# Prerequisites ## 基因組成 ![](https://i.imgur.com/PFJ70xb.png) ![](https://i.imgur.com/ZlxsXBo.png) 基因是由 **DNA** , 一種叫做 **histone** 的蛋白質,以及一些其他的蛋白質所組成。DNA透過纏繞 histones 調整基因轉錄。其中,轉錄因子(TF)是只夠結合在某基因上的蛋白質,這些蛋白質能夠調控基因的轉錄,透過調控RNA聚合酶和DNA模板的結合。 ## ChIP-Seq ### 功能 ![](https://i.imgur.com/kR65EBv.png) 在DNA上會有很多蛋白質,這些蛋白質各有不同的作用。而ChIP-Seq便是一種工具,能夠決定某個特定的蛋白質結合的基因組位置。 ### 步驟 ![](https://i.imgur.com/4NfgwcJ.png) 1. 將DNA分段(因為電腦無法一次輸入太大筆的資料) ![](https://i.imgur.com/xCgg1r2.png) 2. 給想要檢測的蛋白質附上抗體 ![](https://i.imgur.com/awxl4h3.png) 3. 分離想要檢測的DNA片段 ![](https://i.imgur.com/SdYFNEK.png) 4. 將蛋白質去除 ![](https://i.imgur.com/txzbnpL.png) 5. 將Sequence Adapter附著在準備好的基因兩端 ![](https://i.imgur.com/sNQHEhr.png) 6. PCR Amplify 這些 DNA ![](https://i.imgur.com/Fb3GPEu.png) 7. Sequences 和 去除不需要的輸入 ![](https://i.imgur.com/KBAHDVA.png) 8. 定位 ![](https://i.imgur.com/qjCk78E.png) 9. 資料分析 ![](https://i.imgur.com/gXZEjW1.png) ## DNase-Seq ### 功能 DNase-Seq 也是一種工具,用來決定DNA中,nucleosomes間隔的片段。 ### 步驟 ![](https://i.imgur.com/yGuAm5C.png) 1. 分割想要檢測的DNA片段 ![](https://i.imgur.com/Qxxn2Pf.jpg) ![](https://i.imgur.com/LeCoAMk.png) 纏繞histones的DNA片段會妨礙機器讀取資料,因此我們需要將DNA片段分割。另一方面,結合其他蛋白質(TF等)的DNA片段會將nucleosomes分開(這些片段便是決定DNA功能的片段),藉此我們便可以將這些DNA片段分開。這時,我們需要使用一種叫做DNase I的酵素,將DNA片段一一切下。 2. 將Sequence Adapter附著在準備好的基因兩端 ![](https://i.imgur.com/pyANJde.png) 3. PCR Amplify 這些 DNA ![](https://i.imgur.com/nxXeevj.png) 4. 資料分析 ![](https://i.imgur.com/IbhcgvP.png) 較常出現的基因片段會重疊(pile up),而這些基因片段便是DNaseI Hypersensitive Sites(DHS) **References** [GuanLab/Leopard - GitHub](https://github.com/GuanLab/Leopard) [StatQuest: A gentle introduction to ChIP-Seq](https://www.youtube.com/watch?v=nkWGmaYRues) [轉錄因子- 維基百科,自由的百科全書](https://zh.wikipedia.org/zh-tw/%E8%BD%AC%E5%BD%95%E5%9B%A0%E5%AD%90) [DNase-Seq Introduction](https://www.youtube.com/watch?v=4VE44dAOe-g)
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