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title: Protocolo de preparación de rebanadas *ex vivo* en roedores adultos

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# Protocolo de preparación de rebanadas *ex vivo* en roedores adultos

1. Anestesiar al animal con pentobarbital 30 mg/kg.
2. Perfundir con la solución (1) fisiológica para Perfusión.
3. Disección del cerebro, inmediata y conservar en la misma solución (1) mientras se prepara el vibratomo para cortar. 
4. Colocar la solución (1) en el vibratomo y ajustar parámetros.
5. Rebanar el cerebro y colocar dichas rebanadas en solución (2) oxigenada, durante 10 min.
6. Permeabilizar con el fluoróforo de preferencia, durante 45-50 min, en incubación. 
7. Registrar


#### **Solución (1) fisiológica para Perfusión y corte**

Solutos                          |  mM
:------------------------------------:|:----------------------------------
Sacarosa| 252
KCl     | 5
CaCl    | 2
MgSO    | 2
NaHCO   |26
NaHPO   |1.25 
Glucosa| 10

Vol = 100 mL a ~4°C

#### **Solución (2) fisiológica para Registrar**

### ACSF 1x

Solutos                          |  mM
:------------------------------------:|:----------------------------------
NaCl| 126
KCl     | 5
CaCl    | 2
MgSO    | 2
NaHCO   |26
NaHPO   |1.25 
Glucosa| 10

Vol = 1L Temp amb. Oxigenada

