# Protocolo de preparación de rebanadas *ex vivo* en roedores adultos

1. Anestesiar al animal con pentobarbital 30 mg/kg.
2. Perfundir con la solución (1) fisiológica para Perfusión.
3. Disección del cerebro, inmediata y conservar en la misma solución (1) mientras se prepara el vibratomo para cortar.
4. Colocar la solución (1) en el vibratomo y ajustar parámetros.
5. Rebanar el cerebro y colocar dichas rebanadas en solución (2) oxigenada, durante 10 min.
6. Permeabilizar con el fluoróforo de preferencia, durante 45-50 min, en incubación.
7. Registrar

#### **Solución (1) fisiológica para Perfusión y corte**

Solutos | mM
:------------------------------------:|:----------------------------------
Sacarosa| 252
KCl | 5
CaCl | 2
MgSO | 2
NaHCO |26
NaHPO |1.25
Glucosa| 10

Vol = 100 mL a ~4°C

#### **Solución (2) fisiológica para Registrar**

### ACSF 1x

Solutos | mM
:------------------------------------:|:----------------------------------
NaCl| 126
KCl | 5
CaCl | 2
MgSO | 2
NaHCO |26
NaHPO |1.25
Glucosa| 10

Vol = 1L Temp amb. Oxigenada