# Preparación Carmustina

### BCNU: [Sigma-Carmustine](https://www.sigmaaldrich.com/MX/es/product/sigma/c0400?context=bbe)

#### Almacenamiento -20°C

Concentración reportada por [Bernadete, 2002](https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12199722/) y [Moroni, R.F.](https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/j.1528-1167.2007.01440.x).
**20 mg**

Concentración de prueba, Lab-C13
**30 mg**

*** LAS PREPARACIONES ESTÁN PENSADAS PARA UN **PESO PROMEDIO** (400g) DE UNA RATA PRIMÍPARA, CON 15 DÍAS DE GESTACIÓN.

**Preparación:**
- ALÍCUOTAS INDIVIDUALES (1mL)

1. Diluir en 1 mL glucosa 5% (w/v) (Usar H2O Destilada).
2. Pesar la carmustina correpondiente a cada concentración deseada.
*Se recomienda **usar un tubo Eppendorf de 2 mL** para este paso (Tarar el gramaje del tubo y colocar la carmustina dentro, hasta llegar el peso deseado).*
:::spoiler Ayuda
$$
\begin{array}{}
X mg = \frac{X mg}{kg}(X kg) \\
Ej.:
20 mg = \frac{20 mg}{kg}(0.4 kg) \\
= 8 mg
\end{array}
$$
:::
3. Agregar al tubo con la carmustina, el 1 mL de glucosa 5%.
4. Mezclar hasta diluir.
5. Rotular con fecha y almacenar en congelación.

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### Notas:
- A temperatura ambiente suele hacerse líquido y dificulta su pesaje. *Recomendación:* Pesar rápidamente la cantidad deseada, o bien tener una hielera junto a ti, para no calentar el vial.
- El soluto se encuentra dentro de un tubo estrecho. Usar una pala para pesar, delgada para poder sacarlo.
- La dilución de la carmustina debe hacerse siempre con sacarosa o glucosa al 5%, para facilitar la dilución. De otro modo, no se disolverá.
- Usa un agitador (Vortex) para la mezcla de los solutos y solventes , hasta que se haya diluído por completo. (Tardará unos minutos. No te desesperes).
- La mezcla generalmente tiene una tenue coloración amarillenta, al estar lista. (Entre más BCNU, más amarilla).
- Congelar a ~20°C cada alícuota preparada, para su almacenamiento.

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## Inyección de BCNU

De acuerdo al desarrollo embrionario de los roedores. Las ratas tienen un pico de [neurogénesis al día ~E15 (*fig.4)](https://www.researchgate.net/publication/318710120_Sculpting_Cerebral_Cortex_with_Serotonin_in_Rodent_and_Primate), por lo que es a esta fecha en donde lesionamos con BCNU.

La inyección debe ser **vía I.P**, a un lado del saco embrionario, con una aguja de 0.50 mm x 16 mm.

**Cada alícuota contiene 1 mL de carmustina para un peso de 400g, por lo que se debe calcular el volúmen a inyectar si la rata pesa menos o más.**

:::spoiler Ayuda
$$
\begin{array}{}
400 g = 1 mL \\
Xg = Y mL \\
Y mL = \frac{Xg(1m L)}{400 g}
\end{array}
$$
:::